采樣 

采樣按GB/T14699.1（ISO 6497:2002,IDT）進(jìn)行。 

重要的是實驗室收到份真正有代表性的樣品并在運輸及保存過程中不受到破壞或不發(fā)生變化。

8 試樣制備 

試樣按GB/T 20195 制備。 

用粉碎裝置（6.1）將實驗室風(fēng)干樣粉碎，使其能通過篩孔為1mm的篩，充分混合。 

如手工操作方法，按第9章處理。

如用半自動操作方法，則按第10章處理。

9 手工操作法分析步驟

9.1 試料 

稱取約1g制備的試樣（第8章），準(zhǔn)確至0.1mg（m1）。 

如果試樣脂肪含量超過100g/kg，或試樣中脂肪不能用石油醚（5.8）直接提取，則將試樣裝移至濾堝（6.3），并按9.2處理。 

如果試樣脂肪含量不超過100g/kg，則將試樣裝移至燒杯（6.6）。如果其碳酸鹽（碳酸鈣形式）超過50g/kg，按9.3處理；如果碳酸鹽不超過50g/kg，則按9.4處理。

9.2 預(yù)先脫脂 

在冷提取裝置（6.10）中，在真空條件下，試樣用石油醚（5.8）脫脂3次，每次用石油醚30mL，每次洗滌后抽吸干燥殘渣，將殘渣裝移至燒杯（6.6）。

9.3 除去碳酸鹽 

將100mL鹽酸（5.2）傾注在試樣上，連續(xù)振搖5min，小心將此混合物傾注濾堝，濾堝底部覆蓋薄層濾器輔料（5.6）。 

用水洗滌兩次，每次用水100mL，細(xì)心操作終使盡可能少的物質(zhì)留在濾器上。

將濾堝內(nèi)容物轉(zhuǎn)移至原來的燒杯中并按9.4處理。

9.4 酸消煮

將150mL硫酸（5.3）傾注在試樣上。盡快使其沸騰，并保持沸騰狀態(tài)30min±1min。 

在沸騰開始時，轉(zhuǎn)動燒杯段時間。如果產(chǎn)生泡沫，則加數(shù)滴防泡劑（5.7）。在沸騰期間使用個適當(dāng)?shù)睦鋮s裝置保持體積恒定（見6.6和6.11）。

9.5 次過濾 

在濾堝中（6.3）鋪層濾器輔料（5.6），其厚度約為濾堝高度的五分之，濾器輔料上可蓋篩板（6.4）以防濺起。 

當(dāng)消煮結(jié)束時，將液體通過個攪拌棒濾至坩堝中，用弱真空抽濾，使150mL幾乎全部通過。如果濾器堵塞，則用個攪拌棒小心地移去覆蓋在濾器輔料上的粗纖維。 

殘渣用熱水洗洗5次，每次約10mL水，要注意使濾堝的過濾板始終有濾器輔料覆蓋，使粗纖維不接觸濾板。 

停止抽真空，加定體積的丙酮（5.5），剛好能覆蓋殘渣，靜置數(shù)分鐘后，慢慢抽濾排出丙酮，繼續(xù)抽真空，使空氣通過殘渣，使之干燥。

9.6 脫脂 

在冷提取裝置（6.10）中，在真空條件下，試樣用石油醚（5.8）脫脂3次，每次用石油醚30mL，每次洗滌后抽吸干燥。

9.7 堿消煮 

將殘渣定量轉(zhuǎn)移至酸消煮用的同燒杯中。 

加150mL氫氧化鉀溶液（5.4），盡快使其沸騰，保持沸騰狀態(tài)30min±1min，在沸騰期間用同適當(dāng)?shù)睦鋮s裝置（6.6和6.11）使溶液體積保持恒定。

9.8 第二次過濾 

將杯內(nèi)容物通過濾堝（6.3）過濾，濾堝內(nèi)鋪有層濾器輔料（5.6），其厚度約為濾堝高度的五分之，上蓋篩板（6.4）以防濺起。

殘渣用熱水洗至中性。 

殘渣在真空條件下用丙酮（5.5）洗滌3次，每次用丙酮30mL，每次洗滌后抽吸干燥殘渣。

9.9 干燥 

將濾堝置于灰化皿（6.5）中，灰化皿及內(nèi)容物在130℃干燥箱中（6.7）中至少干燥2h。 

在灰化或冷卻或冷卻過程中，濾堝的燒結(jié)濾板可能有些部分變得松散，從而可能導(dǎo)致分析結(jié)果錯誤，因此將濾堝置于灰化皿中。 

濾堝和灰化皿在干燥器（6.8）中冷卻，從干燥器中取出后，立即對濾堝和灰化皿進(jìn)行稱量（m2），準(zhǔn)確至0.1mg。

9.10 灰化 

將濾堝和灰化皿置于馬福爐（6.9）中，其內(nèi)容物在500℃±25℃下灰化，直至冷卻后連續(xù)兩次稱量的差值不超過2mg。 

每次灰化后，讓濾堝和灰化皿初步冷卻，在尚溫?zé)釙r置于干燥器中，使其*冷卻，然后稱量（m3），準(zhǔn)確至0.1mg。

9.11 空白測定 

用大約相同數(shù)量的濾器輔料（5.6），按9.4至9.10進(jìn)行空白測定，但不加試樣。

灰化（9.10）引起的質(zhì)量損失不應(yīng)超過2mg。

按第11章處理。